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          無塵室沉降菌測試標準操作規程
          發布時間:2015-05-15 15:48:25   瀏覽:4530

          無塵室沉降菌測試標準操作規程

           

          1、菌落:細菌培養后,由一個或幾個細菌繁殖而形成的一細菌集落,簡稱CFU。通常用個數表示。

          2、測試方法:沉降法,即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養基平皿,經48小時以上培養,在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數,來評定潔凈環境內的活微生物數,并以此來評定無塵室的潔凈度。

          3、所用的儀器和設備

          1)高壓消毒鍋:使用時參照文件GZ-ZL-SOP-066-00進行操作。

          2)恒溫培養箱:必須定期對培養箱的溫度計進行檢定。

          3)培養皿:一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培養皿。使用前將培養皿置于121℃濕熱滅菌20分鐘。

          4、培養基:普通營養瓊脂培養基。將培養基加熱熔化,冷卻至約45℃在無菌操作條件下將培養基注入培養皿,每皿約15m1。待瓊脂培養基凝固后,將培養基平皿放入30~35℃恒溫培養箱中培養數小時,若培養基平皿上確無菌落生長,即可供采樣用,制備好的培養基平皿應在2~8℃的環境中存放。

          5、測試步驟

          1)采樣方法:將已制備好的培養皿放置在預先確定的取樣點,打開培養皿蓋,使培養基表面暴露0.5小時,再將培養皿蓋上蓋后倒置。
          2)培養,時間不少于48小時。每批培養基應有對照試驗,檢查培養基本身是否污染,可每批選定3只培養皿作對照培養。

          3)菌落計數:用肉眼直接計數,然后用5~10倍放大鏡檢查,有否遺漏。若培養皿上有2個或2個以上菌落重疊,可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數。

          6、注意事項

          1)測試用具要做滅菌處理,以確保測試的可靠性、正確性。

          2)采取一切措施防止人為對樣本的污染。

          3)對培養基、培養條件及其他參數作詳細的記錄。

          4)由于細菌種類繁多,差別甚大,計數時一般用透射光于培養皿背面或正面仔細觀察,不要漏計培養皿邊緣生長的菌落,并須注意細菌菌落與培養基沉淀物的區別,必要時用顯微鏡鑒別。

          5)采樣前應仔細檢查每個培養皿的質量,如發現變質、破損或污染的應剔除。

          7、測試規則

          1)測試狀態

          (1)沉降菌測試前:被測試無塵室(區)的溫濕度須達到規定的要求,靜壓差、必須控制在規定值內。被測試無塵室(區)已消毒。

          (2)測試狀態有靜態和動態兩種,并在報告中注明測試狀態。

          (3)測試人員:測試人員必須穿戴符合環境潔凈度級別的工作服。靜態測試時,室內測試人員不得多于2個人。

          2)測試時間

          (1)對單向流,如100級凈化房間內及層流工作臺,測試應在凈化空調系統正常運行不少于10分鐘后開始。

          (2)對非單向流,如10000級、100000級以上的凈化房間,測試應在凈化空調系統正常運行不少于30分鐘開始。

          8沉降菌計數
          1)最少采樣點數目:可按表1確定。在滿足最少測點數的同時,還宜滿足最少培養皿數,見表2。

          表1 最少采樣點數目

          面積(m2) 

          潔凈度級別

           

          100 

          10000 

          100000 

          300000

          <10 

          2~3 

          2

          ≥10~<20 

          2

          ≥20~<40 

          2

          ≥40~<100 

          16 

          2

          ≥100~<200 

          40 

          10 

          3

          注:表中的面積對于單向流無塵室是指送風面積,對于非單向流無塵室是指房間面積。

          表2 最少培養皿數

          潔凈度級別 

          所需Φ90mm培養皿數(以沉降0.5小時計)

          100

           14

          10000

          2

          100000

           2

          300000

          2

          2)采樣點的布置:工作區測試點位置離地0.8~1.5m左右(略高于工作面)??稍陉P鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點,采樣點的布置應力求均勻,避免采樣點在某局部區域過于集中,某局部區域過于稀疏。

          3)記錄:測試報告中應記錄房間溫度、相對濕度、壓差、測試狀態及測試數據。

          4)結果計算:用計數方法得出各個培養皿的菌落數。平均菌落數的計算見下式:m1+m2+……+mn

          平均菌落數m=n

          式中:m為平均菌落數;m1為1號培養皿菌落數;m2為2號培養皿菌落數;mn為n號培養皿菌落數;n為培養皿總數。

          5)結果評定:用平均菌落數判斷無塵室的空氣中的微生物。

          6)無塵室(區)內的平均菌落數必須低于所選定的評定標準(見表3)。

          表3

          潔凈級別 

          100級 

          10000級 

          100000級 

          300000級

          標準(平均) 

          1個/皿 

          3個/皿 

          10個/皿 

          15個/皿

          7)若某無塵室(區)的平均菌落數超過評定標準,則必須對此區域先行消毒,然后重新測試兩次,測試結果必須合格。

          主要參考文獻:國家標準GB/T 16294-1996

          原文來源:http://www.alexestrin.com/   黃生13570963007

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